مطالعه اثر بیان همزمان چاپرون ها در تولید آنتی بادی Fab ضد TNF-α در میزبان E. coli
Investigation of co-expression with molecular chaperones in production of anti TNF-α fab antibody in E.coli.
مجریان: صفر فرج نیا
خلاصه روش اجرا: توالی نوکلئوتیدی کد کننده آنتی بادی Fab در E. coli ترانسفرم شده و کلونهای بیانی شناسایی و انتخاب خواهند شد. سپس این سلولها با پلاسمید های کد کننده چاپرونها ترانسفرم و بر روی محیط انتخابی سلکت خواهند شد و اثر بیان توام چاپرونها با آنتی بادی مورد بررسی قرار خواهد گرفت. در نهایت اثر عوامل محیطی و فیزیکی نظیر دما و غلظت القاگر بر میزان بیان و محلولیت مورد بررسی قرار خواهد گرفت.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 59510 |
| عنوان فارسی طرح | مطالعه اثر بیان همزمان چاپرون ها در تولید آنتی بادی Fab ضد TNF-α در میزبان E. coli |
| عنوان لاتین طرح | Investigation of co-expression with molecular chaperones in production of anti TNF-α fab antibody in E.coli. |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | آنتی بادی های مونوکلونال و پروتئین های نوترکیب (از نظر: الف- جنبه های تولیدی و 2- پروتکل های درمانی) |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دکتری تخصصی PhD |
| مدت اجرا - ماه | 18 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | تولید و محلول سازی آنتی بادی نوترکیب Fab علیه تومور نکروزیس آلفا که می تواند در آینده در صورت تایید شدن این محصول برای استفاده تجاری در بازارهای دارویی منجر به کاهش قیمت نهایی محصول گردد. |
| اهداف اختصاصی | بیان آنتی بادی ضد TNF-α در میزبان E. coli -بیان توام چاپرون های مورد بررسی با آنتی بادی ضد TNF-a و بررسی اثر آن بر روی میزان بیان و محلولیت آنتی بادی Fab ضد TNF-α -بررسی اثرعواملی محیطی شامل دما، غلطت القاگر و اجزا محیط کشت در بیان آنتی بادی Fab ضد TNF-α |
| چکیده انگلیسی طرح | The nucleotide sequence encoding the Fab antibody will be transformed into E. coli and expression clones will be identified and selected. These cells will then be transformed with plasmids encoding chaperones and selected on a selective medium, and the effect of co-expression of chaperones with antibody will be examined. Finally, the effect of environmental and physical factors such as temperature and inducer concentration on expression and solubility will be examined. |
| کلمات کلیدی | FAB: قسمتی از مولکول آنتی بادی است که در اتصال به آنتی ژن نقش دارد و به عنوان ابزاری قدرتمند در درمان، تشخیص و مطالعات پایه نقش دارد. TNF-α: یک سیتوکاین است که نقش بسیار مهمی در مکانیسم آسیب زایی بیماریی های مزمن التهابی مانند آرتریت روماتوئید دارد. Chaperone: ملکولهایی هستند که با اتصال به قسمتهای آب گریز پروتئین هدف، از تجمع آنها به شکل نامحلول و غیرفعال انکلوژن بادی جلوگیری کرده و به پروتئینها کمک می کنند که شکل طبیعی پایدارشان را به دست آورند. IPTG: ایزوپروپیل تیو گالاکتوزید که به عنوان عامل القا کننده در بیان ژن نوترکیب نقش دارد. |
| ذینفعان نتایج طرح | صنعت |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| صفر فرج نیا | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| نصرت اله ضرغامی | مشاور |
| حسن داریوش نژاد | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر چاپرونهای مولکولی باعث افرایش بیان پریپلاسمی و تولید آنتی بادیهای Fab محلول میگردندمتن خبر بیان پری پلاسمی در E. coli یکی از استراتژیهای مناسب برای بیان پروتئینهای نوترکیب دارای پیوندهای دی سولفید است اما تشکیل اجسام انکلوژن و انتقال ناکارآمد پروتئین مورد نظر به قسمت پریپلاسم مانعی هستند که مزایای این سیستم بیانی را تهدید می کند. بیان همزمان با چاپرونهای مولکولی یک راه حل قابل توجه برای حل این مشکل محسوب میشود. در این مطالعه اثرات بیان توام با چاپونهای مولکولی و بهینه سازی شرایط کشت در بهبود انتقال پریپلاسمی قطعه آنتی بادی Fab مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظورپلاسمید pKJE7 برای بیان همزمان چاپرونهای DnaK / DnaJ / GrpE در سلولهای BL21 و سویه Shuffle (با بیان دائمی چاپرون DsbC) استفاده شد. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که بیان همزمان با چاپرونهای مولکولی باعث افزایش انتقال پریپلاسمی و تولید پروتئین نوترکیب بصورت محلول می گردد. با توجه به نتایج بدست آمده کاربرد چاپرونهای مولکولی برای افزایش بیان محلول پروتئین نوترکیب در سیستم بیانی E. coli پیشنهاد می گردد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
