بررسی اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان بیان میکرو RNA و فاکتورهای موثر در تکامل سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان
The effects of oral nanocurcumin on expression levels of microRNA and Treg cells development factors in ankylosing spondylitis patients
مجریان: مجید احمدی
خلاصه روش اجرا: این مطالعه به صورت کارآزمایی بالینی تصادفی بر روی دو جامعه آماری صورت می گیرد که شامل دو گروه بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان دریافت کننده دارو و عدم دریافت کننده دارو می باشد. بیماران به دو دسته دریافت کنندگان نانوکورکومین خوراکی با دوز 80 mg/ dayو دارونما (placebo) تقسیم می شوند که هر دو گروه طول دوره درمانی معادل 4 ماه را خواهند داشت. گروه مکمل 80 میلی گرم نانوکورکومین و گروه کنترل نیز کپسول دارونما دریافت خواهند کرد. لازم به ذکر است که تهیه و تولید کپسول های نانوکورکومین در شرکت اکسیر سینا انجام می گیرد. کپسولهای بیماران به صورت ماهانه و در بسته های حاوی 60 کپسول به بیماران داده خواهد شد و از بیماران می خواهیم که در طول 4 ماه مدت مطالعه روزانه کپسول را مصرف کنند. مصرف کپسولها و عوارض ناشی از مصرف به صورت هفتگی و از طریق تماس تلفنی پیگیری شده و بیماران نیز می توانند در طول مطالعه در صورت لزوم با پژوهشگر تماس بگیرند. بعد از نمونه گیری از هر دو گروه و جدا سازی پلاسما، سلول های تک هسته ای خون محیطی را با استفاده از فایکول جدا شده و به صورت تازه و در مجاورت PHA کشت داده می شوند. از PBMCها برای اندازه گیری میزان بیان miRNA-146a، 27miRNA- و miRNA-17 استفاده می شود. در این راستا از کیت اختصاصی استخراج miRNA از سلول استفاده می شود. سپس میزان نسخه های miRNA ها با استفاده از Quantitative Real time PCR و پرایمر های اختصاصی در مقایسه با U6 به عنوان کنترل داخلی بر اساس میزان فلورسانس ایجاد شده با SYBR Green اندازه گیری می شود. در مرحله بعد فراوانی سلول های Treg در خون محیطی بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان قبل و بعد از دریافت نانوکورکومین خوراکی با روش فلوسایتومتری بررسی خواهد شد و با گروه کنترل مقایسه می گردد. به منظور بررسی میزان بیان فاکتور نسخه برداری اصلی (Foxp3) و سایتوکاین اختصاصی (IL-10, TGF-β) مربوط به زیرگروه سلول های Treg ، RNAکل سلول ها با استفاده از trizolاستخراج شده و با روش Quantitative Real time PCR سنجش می شود. در این روش کمی میزان نسخه های mRNA فاکتور های مذکور در مقایسه با β - اکتین به عنوان کنترل داخلی بر اساس میزان فلورسانس ایجاد شده اندازه گیری می شود، که در آن از رنگ اینترکاله شونده با DNA دو رشته ای(SYBR Green) استفاده شده است. جهت بررسی مقدار سایتوکاین IL-10 و TGF-β در سوپ رویی سلول های کشت داده شده از تکنیک الایزا استفاده می شود. در این روش میزان سایتوکاین مذکور بر اساس مقدار OD ایجاد شده با دستگاه الایزا ریدر گزارش می شود. در این طرح اثرات درمانی نانوکورکومین خوراکی در بیماران اسپوندیلیت آنکیلوزان مورد بررسی قرار می گیرد و برای این منظور اهداف زیر تعیین گردیده است: 1- تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان بیان miRNA موثر در تکامل سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل 2- تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان فراوانی سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل 3- تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان بیان فاکتور نسخه برداری موثر در تکامل سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل 4- تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان بیان ژن سایتوکاین مترشحه از سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل 5- تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان ترشح سایتوکاین مترشحه از سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 59303 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان بیان میکرو RNA و فاکتورهای موثر در تکامل سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان |
| عنوان لاتین طرح | The effects of oral nanocurcumin on expression levels of microRNA and Treg cells development factors in ankylosing spondylitis patients |
| نوع طرح | طرح تحقیقاتی |
| اولویت طرح | بیماری های اتوایمیون (آرتریت روماتوئید و لوپوس اریتماتوز سیستمیک) |
| نوع مطالعه | مطالعه مورد/شاهد ( Case - Control ) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | اسپوندیلیت آنکیلوزان یک بیماری خودایمن التهابی مزمن است که با اختلال سلول های T همراه می باشد. این بیماری اغلب ستون فقرات و استخوانهای لگن را درگیر میسازد. التهاب به ویژه ناحیه خاجی - تهیگاهی Sacroiliac مفاصل لگن، ستون مهرهای کمری، سینهای و گردنی را درگیر میکند. بیماری اسپوندیلیت انکیلوزان معمولا در سنین 35-15 سالگی شروع شده و در مردان 3-2 برابر شایعتر از زنان است. ممکن است در خانواده بیمار هم سابقه وجود موارد مشابه این بیماری وجود داشته باشد. شیوع اسپوندیلیت انکیلوزان حدود یک نفر از هر هزار نفر است. آنتی ژن HLA-27 به عنوان مهمترین ریسک فاکتور این بیماری شناخته شده است که در 90 درصد بیماران وجود دارد. مطالعات مختلف نشان می دهد که فعال شدن سلول های Th17 در حفظ شرایط التهابی در بیماران اسپوندیلیت آنکیلوزان ضروری است. افزایش بیش از حد فعالیت تهاجمی سلول های Th17 وTh1 که عملکرد آن ها ترشح سایتوکاین های پیش التهابی است و کاهش تعداد و فعالیت سلول های T تنظیم کننده که در حالت طبیعی منجر به کنترل التهاب می شوند، در این بیماری دیده می شود. کورکومین (دی فرولوئیل متان) یک پلی فنل از دسته دی آریل هپتانوئیدها است. این ماده جز فعال گیاه پایا است که با نام زردچوبه شناخته می شود. کورکومین با طیف وسیعی از پروتئینها باند شده و توانایی مهار فعالیت کینازهای مختلف را دارد.کورکومین به عنوان یک ترکیب آنتی اکسیدانت، ضد تکثیر سلولی، ضد تهاجمی، ضدآنژیوژنیک بوده و میتواند در درمان آلزایمر، پارکینسون، مالتیپل اسکلروزیس ، بیماریهای قلبی-عروقی، بیماریهای میکروبی و آرتریت و اسپوندیلیت آنکیلوزان مورد استفاده قرار گیرد. با توجه به ماهیت چربی دوستی کورکومین، جذب خوراکی این ماده در فرم های معمول خوراکی مانند پودر، کپسول و قرص، بسیار پایین است. کورکومین (مثل مواد چربی دوست دیگر) در فرم های معمول پس از مصرف خوراکی، مقادیر اندکی از آن به صورت طبیعی به میسل تبدیل و جذب میشود؛ اما وقتی به صورت کپسوله شده در نانومیسل ها در میآید، تمام کورکومین در بخش هیدروفوبیک نانومیسل های کورکومین محبوس می شود. این نانومیسل های کروی شکل باعث افزایش حلالیت کورکومین در آب به بیش از 100هزار مرتبه میشوند که به طور قابل ملاحظه ای سبب افزایش جذب کورکومین می گردند. در میان عوامل تاثیر گذار بر عملکرد سیستم ایمنی می توان به miRNA ها اشاره کرد که RNA های کوچک غیر کد شونده ای هستند که 19-22 نوکلئوتید طول دارند. گروهی از miRNA ها به صورت گردشی در پلاسما یافت می شوند که تغییرات آنها می تواند در بروز التهاب و یا مهار آن نقش داشته باشد. پروفایل بیانی miRNA ها در نمونه های خون و سرم گرفته شده از بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان بررسی شده و نشان داده شده است که miRNA-146a، 27miRNA- و miRNA-17 در این بیماران تنظیم کاهشی دارند. بنابراین miRNA-106bو miRNA-25 باعث کاهش سلول های بیان کننده FoxP3 و کاهش تولید TGF-β که نقش کلیدی در کنترل التهاب دارند، می شوند. در نتیجه ی کاهش Treg و متعاقبا TGF-β التهاب گسترش یافته و منجر به پیشرفت روند بیماری اسپوندیلیت آنکیلوزان می شود. |
| اهداف اختصاصی | تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان بیان miRNA موثر در تکامل سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل -تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان فراوانی سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل -تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان بیان فاکتور نسخه برداری موثر در تکامل سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل -تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان بیان ژن سایتوکاین مترشحه از سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل -تعیین اثرات نانوکورکومین خوراکی بر میزان ترشح سایتوکاین مترشحه از سلول های Treg در بیماران مبتلا به اسپوندیلیت آنکیلوزان در مقایسه با گروه کنترل |
| چکیده انگلیسی طرح | The effects of oral nanocurcumin on expression levels of microRNA and Treg cells development factors in ankylosing spondylitis patients |
| کلمات کلیدی | AS: اسپوندیلیت انکیلوزان یک نوع بیماری روماتیسمی مزمن است که عمدتا ستون مهره و مفاصل ساکروایلیاک (مفصل بین ساکروم و لگن) را گرفتار می کند. micro RNA(miRNA): microRNAs (miRNAs)مولکول های RNAای کوچک با طول 21 تا 23 نوکلئوتید می باشند. متعلق به کلاسی از RNA های تنظیمی غیر کد کننده هستند. microRNAs با اتصال به ناحیه ی 3 UTR mRNA هدف باعث مهار نسخه برداری یا تخریب mRNA پس از رونویسی می شوند. 46miR-1: از دسته miRNA های التهابی است که باعث کاهش بیان Foxp3+ و کاهش تمایز Tregو کاهش تولید TGF-βدر نتیجه افزایش التهاب می شود. 27miR-: از دسته miRNA های التهابی است که باعث کاهش بیان Foxp3+ و کاهش تمایز Treg و کاهش تولید TGF-β در نتیجه افزایش التهاب می شود. Treg: زیر مجموعه ای از سلول های TCD4+که با تولید سایتوکاین های ضد التهابی TGF-β و IL-10 باعث کاهش التهاب و پیشرفت بیماری AS می شوند. Foxp3 یک فاکتور نسخه برداری و عضو خانواده سرچنگالی از عوامل نسخه برداری است و برای تکامل و عملکرد قسمت عمده ای از سلول های Tتنظیمی ضروری است. کورکومین: کورکومین (دی فرولوئیل متان) یک پلی فنل از دسته دی آریل هپتانوئیدها است که فعالیت های مختلفی از قبیل آنتی اکسیدانی و ضد التهابی دارند و باعث کاهش التهاب می شوند. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| مجید احمدی | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| مهدی یوسفی | همکار اصلی |
| لیلی عاقبتی | همکار اصلی |
| صنم دولتی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر مکمل نانوکورکومین در بهبود وضعیت بیماران مبتلا به اسپوندلیت انکلوزان تاثیر داشتمتن خبر بیماری اسپوندلیت یک نوع بیماری خود ایمنی٫ التهابی مزمن می باشد که در آن سیستم ایمنی ستون فقرات و مفاصل بیمار را درگیر می کند. مکمل نانوکورکومین نوعی مکمل غذایی مشتق از زردچوبه می باشد که اثرات ضدالتهابی آن تایید شده است. در این مطالعه محققین دانشگاه علوم پزشکی تبریز به مدت ۴ ماه به صورت روزانه داروی نانوکورکومین را به ۱۲ بیمار تجویز کردند. در مقابل ۱۲ بیمار دیگر دارونما دریافت نمودند. قبل و بعد از تجویز دارو علایم بیماران به همراه فاکتورهای سیستم ایمنی بیماران بررسی شد. نتایج مطالعه نشانگر تاثیر مکمل نانوکورکومین در بهبود وضعیت بیماران بود. بطوری که هم علایم بیماری تقلیل یافت و هم التهاب ناشی از به هم خوردگی سیستم ایمنی بیماران بهبود یافت. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر مکمل نانوکورکومین در بهبود وضعیت بیماران مبتلا به اسپوندلیت انکلوزان تاثیر داشتمتن خبر بیماری اسپوندلیت یک نوع بیماری خود ایمنی٫ التهابی مزمن می باشد که در آن سیستم ایمنی ستون فقرات و مفاصل بیمار را درگیر می کند. مکمل نانوکورکومین نوعی مکمل غذایی مشتق از زردچوبه می باشد که اثرات ضدالتهابی آن تایید شده است. در این مطالعه محققین دانشگاه علوم پزشکی تبریز در یک مطالعه کارآزمایی بالینی اقدام به تجویز ۴ ماهه مکمل نانوکورکومین به ۱۲ نفر از بیماران مبتلا به اسپوندلیت انکلوزان نمودند. یک گروه ۱۲ نفره دیگر هم به عنوان گروه کنترل مطالعه به جای مکمل نانوکورکومین دارونما دریافت نمودند. قبل و بعد از تجویز دارو علایم بالینی بیماران توسط پرسشنامه های از پیش تهیه شده ثبت شد و یک سری تست های تخصصی برای بررسی فاکتورهای سیستم ایمنی بر روی بیماران انجام گردید. نتایج مطالعه نشانگر تاثیر مکمل نانوکورکومین در بهبود وضعیت بیماران بود. بطوری که هم علایم بیماری تقلیل یافت و هم التهاب ناشی از به هم خوردگی سیستم ایمنی بیماران بهبود یافت. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
