بررسی اثرات سرکوب بیان ژن گیرنده های آلفا هفت نیکوتینی استیل کولین توسط RNA کوچک مداخله گر (siRNA) بر روند پیشرفت سرطان کبد در موش های سوری
Investigation of alpha-7 nicotinic acetylcholine receptors gene suppression by small interfering RNA (siRNA) on liver cancer progression in mice
مجریان: بهزاد برادران
خلاصه روش اجرا: این تحقیق در دو قسمت مطالعات invitro و invivo انجام می شود. در قسمت اول میزان اثربخشی α7nAChR- siRNA بر سرکوب بیان ژن این گیرنده ها در رده سلولی کارسینوم هپاتوسلولار مطالعه خواهد شد. همچنین اثرات ترانسفکشن این siRNA بر میزان سمیت سلولی و القاء آپاپتوز در این سلول ها بررسی خواهد شد. قسمت دوم مطالعات، بر روی موش های سوری نژاد BALB/c نر انجام خواهد شد. به عنوان مدل تجربی ایجاد سرطان کبدی از تجویز داخل صفاقی ترکیب هپاتوکارسینوژن دی اتیل نیتروز آمین (DEN) به عنوان شروع کننده ایجاد تومور به همراه تجویز مزمن تترا کلرید کربن (CCl4) به عنوان تسریع کننده ایجاد تومور در تمامی آزمایشات استفاده خواهد شد. این مدل از نظر اتیولوژی مشابه کارسینوم هپاتوسلولار انسانی بوده و در تمامی حیوانات منجر به ایجاد سرطان می شود. با استفاده از روش Quantitative Real‐Time PCR اثرات تجویز سیستمیک داخل وریدی نانو ذرات حاوی siRNA اختصاصی ژن CHRNA7 بر روی پروفایل بیان ژن های انکوژن و مهار کننده تومور در گروه کنترلی که نرمال سالین دریافت کرده اند و گروه دریافت کننده DEN+CCl4 مورد سنجش قرار خواهد گرفت. همچنین اثرات سرکوب بیان این ژن بر روی میزان آسیب سلول های کبدی، استرس اکسیداتیو، التهاب کبدی، فیبروزکبدی و مارکرهای اختصاصی مرتبط با سرطان کبد در طی روند ایجاد بیماری بررسی خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 59256 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرات سرکوب بیان ژن گیرنده های آلفا هفت نیکوتینی استیل کولین توسط RNA کوچک مداخله گر (siRNA) بر روند پیشرفت سرطان کبد در موش های سوری |
| عنوان لاتین طرح | Investigation of alpha-7 nicotinic acetylcholine receptors gene suppression by small interfering RNA (siRNA) on liver cancer progression in mice |
| نوع طرح | گرنت پژوهشی |
| اولویت طرح | اپیدمیولوژی، پیشگیری، تشخیص زودهنگام، درمان و بازتوانی در سرطانهای شایع |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | خیر |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | خير |
| مقطع پایان نامه | |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | درمان کارسینوم هپاتوسلولار با توجه به استاندارد های درمان پر هزینه و مشکل است و هر ساله هزینه درمان در کنار آزمایشات و اقدامات تشخیصی، بار مالی هنگفتی را بر دوش دولت ها می گذارد. با توجه به اینکه تاکنون نقش گیرنده های آلفا هفت نیکوتینی استیل کولین در تنظیم شروع و پیشرفت تومور در کارسینوم هپاتوسلولار نامشخص باقی مانده است امید این می رود تا با مشخص شدن نقش این گیرنده ها و مکانیسم های سیگنالینگ مرتبط با آن در آینده استراتژی های درمانی جدیدی در پیش گیری و درمان بیماران مبتلا به بیماری های مزمن کبدی و کارسینوم هپاتوسلولار با تولید داروهای جدید به وجود آید. |
| اهداف اختصاصی | بررسی میزان سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن در رده‌ی سلولی سرطان کارسینوم هپاتوسلولار به روش Quantitative real-time PCR -بررسی اثر سایتوکسیک سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن در رده‌ی سلولی سرطان کارسینوم هپاتوسلولار به روش MTT assay -بررسی اثر سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن بر القاء آپوپتوز در رده‌ی سلولی سرطان کارسینوم هپاتوسلولار با روش فلوسایتومتری -بررسی اثرات سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن بر روی سطح بیان ژن و پروتئین این گیرنده ها در مدل تجربی کارسینوم هپاتوسلولار -بررسی اثرات سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن بر روی سطح بیان ژن های مرتبط با تکثیر سلولی در مدل تجربی کارسینوم هپاتوسلولار -بررسی اثرات سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن بر روی سطح بیان ژن های مرتبط با آپاپتوز سلول ها در مدل تجربی کارسینوم هپاتوسلولار -بررسی اثرات سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن بر روی سطح بیان ژن های مرتبط با تغییر اپیتلیال به مزانشیمال (EMT) و ایجاد متاستاز در مدل تجربی کارسینوم هپاتوسلولار بررسی اثرات سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن بر روی سطح بیان ژن های اﻟﻘﺎکﻨﻨﺪه رگ زایی (آنژیوژنز) در مدل تجربی کارسینوم هپاتوسلولار بررسی اثرات سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن بر روی شاخص های مرتبط با آسیب سلولی، استرس اکسیداتیو، التهاب و فیبروز کبدی در مدل تجربی کارسینوم هپاتوسلولار بررسی اثرات سرکوب بیان ژن CHRNA7 از طریق siRNA اختصاصی آن بر روی شاخص های مختلف رشد تومور (نسبت وزن کبد به وزن بدن، تعداد و اندازه تومورها و میزان آلفا فیتو پروتئین) در مدل تجربی کارسینوم هپاتوسلولار |
| چکیده انگلیسی طرح | این تحقیق در دو قسمت مطالعات invitro و invivo انجام می شود. در قسمت اول میزان اثربخشی α7nAChR- siRNA بر سرکوب بیان ژن این گیرنده ها در رده سلولی کارسینوم هپاتوسلولار مطالعه خواهد شد. همچنین اثرات ترانسفکشن این siRNA بر میزان سمیت سلولی و القاء آپاپتوز در این سلول ها بررسی خواهد شد. قسمت دوم مطالعات، بر روی موش های سوری نژاد BALB/c نر انجام خواهد شد. به عنوان مدل تجربی ایجاد سرطان کبدی از تجویز داخل صفاقی ترکیب هپاتوکارسینوژن دی اتیل نیتروز آمین (DEN) به عنوان شروع کننده ایجاد تومور به همراه تجویز مزمن تترا کلرید کربن (CCl4) به عنوان تسریع کننده ایجاد تومور در تمامی آزمایشات استفاده خواهد شد. این مدل از نظر اتیولوژی مشابه کارسینوم هپاتوسلولار انسانی بوده و در تمامی حیوانات منجر به ایجاد سرطان می شود. با استفاده از روش Quantitative Real‐Time PCR اثرات تجویز سیستمیک داخل وریدی نانو ذرات حاوی siRNA اختصاصی ژن CHRNA7 بر روی پروفایل بیان ژن های انکوژن و مهار کننده تومور در گروه کنترلی که نرمال سالین دریافت کرده اند و گروه دریافت کننده DEN+CCl4 مورد سنجش قرار خواهد گرفت. همچنین اثرات سرکوب بیان این ژن بر روی میزان آسیب سلول های کبدی، استرس اکسیداتیو، التهاب کبدی، فیبروزکبدی و مارکرهای اختصاصی مرتبط با سرطان کبد در طی روند ایجاد بیماری بررسی خواهد شد. |
| کلمات کلیدی | • دی اتیل نیتروز آمین (DEN): ترکیب شیمیایی هپاتوکارسینوژنیک با فرمول R1N(–R2)–N=O که منجر به ایجاد سرطان کبد می شود. • گیرنده های آلفا-7 نیکوتینی استیل کولین (α7nAChR): یکی از انواع گیرنده های نیکوتینی که نقش عمده ای در تکثیر و بقاء سلول ها و فرآیندهای مرتبط با ایجاد سرطان دارد. |
| ذینفعان نتایج طرح | شناسایی روش های درمانی نوین و کمک به صنایع داروسازی برای طراحی داروهایی با اهداف درمانی جدید برای درمان بیماران مبتلا به سرطان پیشرفته کبد |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| بهزاد برادران | مجری اول (اصلی-هیات علمی) |
| خلیل حاجی اصغرزاده | همکار اصلی |
| محمد حسین صومی | همکار اصلی |
| امیر علی مختارزاده | همکار اصلی |
| داریوش شانه بندی | همکار اصلی |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر گیرنده Alpha7استیل کولین نیکوتینیک باعث آپوپتوز ناشی از نیکوتین و توقف چرخه سلولی سلولهای کارسینوم کبدی استمتن خبر گیرنده استیل کولین نیکوتینی آلفا 7 ((α7nAChR) یکی از مهمترین گیرنده های نیکوتین است که تا حدودی نیکوتین با اتصال به این گیرنده اثرات خود را اعمال می کند. هدف از این مطالعه تعیین تأثیرات نیکوتین بر فعالیتهای تکثیر سلولی و آپوپتوتیک و با هدف بررسی درگیری α7nAChR در این عملکردها بود.
در مقایسه با گروه های کنترل ، سلول های تحت درمان با نیکوتین کاهش زنده ماندن قابل توجهی بصورت وابسته به دوز در سلول را نشان دادند. علاوه بر این ، نیکوتین باعث آپوپتوز و توقف چرخه سلولی به ویژه در مرحله G2 / M شد. qRT-PCR نشان داد که نیکوتین میزان mRNA α7nAChR و همچنین کاسپاز -3 را افزایش داده و بیان سیکلین B1 را سرکوب می کند. این آزمایشات تعیین می کند که تنظیم مجدد α7nAChR توسط نیکوتین از تکثیر سلولهای HepG2 جلوگیری کرده و باعث آپوپتوز آنها می شود. این اثرات توسط درمان با α7-siRNA مهار می شود ، که نشانگر درگیری مسیرهای α7nAChR در این فرآیند ها است. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
