تعیین میزان متیلاسیون ژنهایTLR-2 و TLR-4 و رابطه آن با سطح بیان این ژنها در بیماران مبتلا به بیماری بهجت
Determination the rate of TLR-4 and TLR-2 genes’ mutilation and its association with expression level of this gens in behcet patients
مجریان: علیرضا خبازی اسکویی , ابراهیم سخی نیا
خلاصه روش اجرا: هدف از اجرای این طرح تعیین سطح بیان ژنهایTLR-2 و TLR-4 در بیماران مبتلا به بیماری بهجت و مقایسه این میزان با گروه کنترل است. برای این منظور از 40 بیمار مبتلا به بیماری بهجت (گروه مورد)مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا و کلینیک آتیه خونگیری بعمل آمده و پس از جدا کردن سلولهای تک هسته ای به روش فایکول جداسازی DNA و RNA صورت گرفته و با استفاده از تکنیک MeDIP ابتدا DNA ژنومی از طریق سونیکاسیون به قطعات کوتاه 300-1000 جفت باز ی شکسته شده و پس از دناتوره کردن بایک آنتی بادی مونوکلونال انکوبه می گردد. این آنتی بادی به 5- متیل سیتوزین دی نوکلئوتید CpG متصل می شود .سپس توالی های متیله شده با استفاده از بیدهای مگنتیک رسوب داده می شوند.در نهایت با استفاده از روش real-time qPCR الگوی متیلاسیون ژنهای مورد نظر مورد بررسی قرار می گیرد. ]13،14[برای بررسی میزان بیان ژنها نیز از روش real-time PCR استفاده خواهد شد. گروه شاهد هم افرادی هستند که فاقد بیماری التهابی و خود ایمنی بوده واز بین مراجعین درمانگاه سرپایی بیمارستان امام رضا به صورت داوطلب انتخاب می شوند.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا |
| کد طرح | 59158 |
| عنوان فارسی طرح | تعیین میزان متیلاسیون ژنهایTLR-2 و TLR-4 و رابطه آن با سطح بیان این ژنها در بیماران مبتلا به بیماری بهجت |
| عنوان لاتین طرح | Determination the rate of TLR-4 and TLR-2 genes’ mutilation and its association with expression level of this gens in behcet patients |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | بیماری های اتوایمیون (آرتریت روماتوئید و لوپوس اریتماتوز سیستمیک) |
| نوع مطالعه | مطالعه مورد/شاهد ( Case - Control ) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | دستیار تخصصی بالینی (رزیدنتی) |
| مدت اجرا - ماه | 15 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | با توجه به اینکه بیماری بهجت در کشور ما از مهمترین بیماریهای خود ایمنی و روماتولوژیک می باشدودر منطقه آذربایجان شیوع نسبتا بالایی د ارد و تا کنون مطالعه ای در خصوص بیان این ژنها صورت نگرفته است . انتظار می رود باتوجه به نقش این دو ژن پاتوژنزو ارتباط آنها با ایجاد بیماریهای خود ایمنی بتوان با بررسی بیان ژنهای فوق نسبت به تشخیص زودهنگام افراد در معرض خطر بعنوان یک تست پیش تشخیصی و در مراحل بعد مانیتوریتنگ پاسخ به درمان در افراد بیمار گره کوچکی از مشکلات و معضلات این بیماران را مرتفع نمود.. |
| اهداف اختصاصی | تعیین سطح متیلاسیون پروموتر ژن TLR-2 درافراد مبتلا به بیماری بهجت و مقایسه با گروه کنترل -تعیین میزان بیان ژن TLR-2 در افرادمبتلا به بیماری بهجت و مقایسه با گروه کنترل -تعیین سطح متیلاسیون پروموتر ژن TLR-4 درافراد مبتلا به بیماری بهجت و مقایسه با گروه کنترل -تعیین میزان بیان ژن TLR-4 در افرادمبتلا به بیماری بهجت و مقایسه با گروه کنترل |
| چکیده انگلیسی طرح | هدف از اجرای این طرح تعیین سطح بیان ژنهایTLR-2 و TLR-4 در بیماران مبتلا به بیماری بهجت و مقایسه این میزان با گروه کنترل است. برای این منظور از 40 بیمار مبتلا به بیماری بهجت (گروه مورد)مراجعه کننده به بیمارستان امام رضا و کلینیک آتیه خونگیری بعمل آمده و پس از جدا کردن سلولهای تک هسته ای به روش فایکول جداسازی DNA و RNA صورت گرفته و با استفاده از تکنیک MeDIP ابتدا DNA ژنومی از طریق سونیکاسیون به قطعات کوتاه 300-1000 جفت باز ی شکسته شده و پس از دناتوره کردن بایک آنتی بادی مونوکلونال انکوبه می گردد. این آنتی بادی به 5- متیل سیتوزین دی نوکلئوتید CpG متصل می شود .سپس توالی های متیله شده با استفاده از بیدهای مگنتیک رسوب داده می شوند.در نهایت با استفاده از روش real-time qPCR الگوی متیلاسیون ژنهای مورد نظر مورد بررسی قرار می گیرد. ]13،14[برای بررسی میزان بیان ژنها نیز از روش real-time PCR استفاده خواهد شد. گروه شاهد هم افرادی هستند که فاقد بیماری التهابی و خود ایمنی بوده واز بین مراجعین درمانگاه سرپایی بیمارستان امام رضا به صورت داوطلب انتخاب می شوند. |
| کلمات کلیدی | متیلاسیون DNA : متیله شدن سیتوزین های واقع در جزایر CPG ناحیه پروموتر ژن :(MeDIP-qPCR)تکنیکی است که در آن DNA متیله توسط رسوب گذاری ایمنی و با استفاده از آنتی بادی ضد 5- متیل سیتوزین رسوب داده می شودو برای تشخیص سطح متیلاسیون پروموتر ژنها از تکنیک Real-time PCR استفاده خواهد شد. |
| ذینفعان نتایج طرح |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| علیرضا خبازی اسکویی | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| ابراهیم سخی نیا | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| سوسن کلاهی | مشاور |
| زهره بابالو | مشاور |
| جعفر فرهادی | همکار اصلی |
| شهریار علیپور | همکار اصلی |
| ندا بهاورنیا | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر متن خبر |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر میزان متیلاسیون Tool-like receptors) TLR-4) در بیماری بهجت کاهش و میزان بیان ژن TLR-4 در این بیماری می تواند افزایش پیدا کند.متن خبر پلی مورفیسم ژن های مختلف مانند ژن های سایتوکین ها عمدتا پیش التهابی گزارش شده است که با استعداد ابتلا به بیماری بهجت ارتباط دارد.با توجه به نقش اثبات شده ژن های TLRs در بیماری بهجت، 50 نفر از بیماران مبتلا به بهجت و 60 نفر از افراد سالم بعنوان گروه کنترل انتخاب شدند و با استفاده از روش saltion out به مقدار مورد نیاز DNA از نمنونه های خونی استخراج شد و پس از تعیین غلظت DNA، برای سنجش میزان متیلاسیون مورد ارزیابی قرار گرفت. با استفاده از آنالیز آماری داده ها نشان داده شد که میزان متیلاسیون ژن TLR-4 در بیماران بهجت نسبت به افراد سالم کاهش می یابد که این کاهش از نظر آماری معنی دار بود. از سوی دیگر میزان بیان ژن TLR-4 در بیماران بهجت نسبت به افراد سالم بطور معنی داری افزایش می یابد. برای ارزیابی بهتر نیاز به بررسی میزان متیلاسیون و بیان ژن سایر ژنهای درگیر در بیماری بهجت و مقایسه آن با فراد سالم باید صورت گیرد. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
