تعیین اثر تیموکینون بر سمیت سلولی و ژنتیکی تری بوتیل هیدروکینون (TBHQ) در رده سلولی HUVEC
Evaluating effect of thymoquinone on the tert-butylhydroquinone geno/ cytotoxicity in the HUVEC cell line
مجریان: پروین دهقان , جعفر عزتی نژاد دولت آبادی
خلاصه روش اجرا: اجرا:هدف تعیین اثر تیموکینون بر روی سمیت ژنتیکی و سلولی تری بوتیل هیدروکینون (TBHQ) دررده سلولی HUVEC و مقایسه اثر سینرژیستی ظرفیت انتی اکسیدانی TBHQ قبل و بعد افزودن تیموکینمون(TQ) می باشد. جهت تعیین سمیت سلولی ترکیب مذکور از تست MTT استفاده خواهد شد که جزئیات کار به تفصیل شرح داده خواهد شد. ارزیابی ژنوتوکسیتی هم، با ارزیابی میزان آپاپتوزیس سلول، فراگمانتاسیون DNA و فراگمانتاسیون کروماتین بترتیب با تغییر در فسفاتیدیل سرین غشاء (Annexin V) با استفاده از فلوسایتومتری، assay) (DNA ladder و DAPI Stainingصورت خواهد گرفت وبرای مقایسه اثر هم افزایی ظرفیت آنتی اکسیدانی از روش DPPHاستفاده خواهد شد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا در دانشکده/مرکز |
| کد طرح | 58945 |
| عنوان فارسی طرح | تعیین اثر تیموکینون بر سمیت سلولی و ژنتیکی تری بوتیل هیدروکینون (TBHQ) در رده سلولی HUVEC |
| عنوان لاتین طرح | Evaluating effect of thymoquinone on the tert-butylhydroquinone geno/ cytotoxicity in the HUVEC cell line |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | کیفیت و ایمنی غذا |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | در فرمولاسیون بیشتر محصولات غذایی، دارویی، آرایشی و بهداشتی از افزودنی های شیمیایی متعددی استفاده می شود به طور معمول این افزودنی ها برای افزایش کیفیت و مدت ماندگاری محصولات اضافه می شود. در طی سالهای اخیر کاربرد افزودنی های شیمیایی و طبیعی در فرمولاسیون مواد غذایی افزایش چشمگیری داشته است. اگر چه مصرف کنندگان به واسطه افزایش بیماری های مزمن بویژه سرطانها، خواهان کاهش مصرف افزودنی ها در مواد غذایی هستند، اما متخصصان با توجه به احتمال افزایش فساد ماده ی غذایی و زنده ماندن و تکثیر میکروب های بیماری زا در مواد غذایی در فقدان افزودنی های غذایی، معتقدند این افزودنی مواد غذایی همراه با عملیات اجرایی مناسب نقش مفیدی در تامین ایمنی مواد غذایی محصولات دارند. روغنهای خوراکی ازآن گروه مواد غذایی هستند که به ناچار افزودنی های غذایی در این محصولات مورد استفاده قرار می گیرد. زیرا 80% روغن مصرفی ایران وارداتی بوده و کشور ایران در انتخاب نوع و کیفیت دانه های کاربردی برای استحصال نقشی ندارد.علاوه براین، پایداری اکسیداتیو روغنها و چربیها و فراورده های غذایی پرچرب تحت تاثیر عوامل مختلفی مانند اکسیژن، نور، حرارت، یون های فلزی و آنزیم ها قرار می گیرد. به همین دلیل، آنتی اکسیدانتها یکی از افزودنی های مهم هستند که برای جلوگیری یا به تاخیر انداختن فساد اکسیداتیو و پایداری اکسیداتیو مواد غذایی، در صنایع غذایی بویژه در صنعت روغن خوراکی به طور گسترده ای مورد استفاده قرار می گیرند. BTA، TBHQ و BHA ، آنتی اکسیدانهای فنلی سنتتیکی هستند که در صنعت روغن خوراکی ایران به طور گسترده ای برای جلوگیری از اکسیداسیون آنها در دمای بالا و حفظ پایداری روغن های غیر اشباع در طی دوره نگهداری بکار می روند. این مواد نه تنها در حضور آهن، در مواد غذایی تغییر رنگ ایجاد نمی دهند بلکه تغییری در عطر و طعم و بوی روغن نیز ایجاد نمی نمایند. در میان آنتی اکسیدانهای فنلی سنتتیکی، TBHQ یکی از قویترین آنتی اکسیدان ها در صنعت روغن خوراکی میباشد و دارای پایداری حرارتی بالایی است نسبت به سایر آنتی اکسیدان های فنلی می باشد. اما کاربرد این آنتی اکسیدان ها، با وجود داشتن کارآیی بالا در به تاخیر انداختن فساد اکسیداتیو، به دلیل احتمال ایجاد سمیت سلولی و سرطانزایی، مورد بحث می باشد.. بر این اساس احتمال می رود که این آنتی اکسیدانها ایمنی مصرف کننده را تهدید نمایند. به همین جهت بایستی ضمن ارزیابی ایمنی آنتی اکسیدانهای مواد غذایی از دیدگاه های مختلف نظیر سیتوتوکسیتی، ژنوتوکسیتی، برهمکنش با درشت مولکولهای زیستی و ... قبل از کاربرد،در صورت عدم امکان حذف از فرمولاسیون مواد غذایی، بایستی راهکارهای مقابله با این اثرات نیز مورد مطالعه قرار گیرد. خصوصیات سمی آنتی اکسیدان های فنلی سنتزی در سالهای اخیر مورد بررسی قرار گرفته است. اثرات کارسینوژنیک این ترکیبات در مقادیر بالا در برخی از بافتهای حیوانی گزارش شده است. آن نشان داده شده است که مصرف مداوم TBHQدر غلظت های بالا منجر به ایجاد ورم پوستی و سرطان در معده موشهای صحرایی، موش ها، همسترها می گردد. در سالهای اخیر برهم کنش مستقیم این مواد با DNA و آلبومین به اثبات رسیده است . به همین دلیل تقاضا مصرف کنندگان برای استفاده از ترکیبات طبیعی به عنوان جایگزین یا کمکی افزایش یافته است. تیموکینون ماده موثره سیاه دانه یک آنتی اکسیدان قوی و مهار گر اثرات سمیت سلولی و ژنتیکی داروها در مطالعات بالینی می تواند به عنوان کمک آنتی اکسیدان های طبیعی و مهار گر اثرات سمیت سلولی و ژنتیکی همراه با TBHQ پیشنهاد گردد. با توجه به مرور بر متون انجام یافته و فقدان مطالعه ای مبنی بر تعیین اثر تیمو کینون بر سمیت سلولی و ژنتیکی TBHQ، این مطالعه با هدف ارزیابی اثر تیموکینون به عنوان آنتی اکسیدان بالقوه بر ایمنی سیتوکسیک و ژنوتوکسیک TBHQ طراحی گردید. |
| اهداف اختصاصی | <p><span dir="RTL" lang="FA" style="font-family:"B Koodak"; font-size:11.0pt">تعیین اثر هم افزایی خاصیت آنتی اکسیدانی </span><span style="font-family:"Times New Roman","serif"; font-size:11.0pt">TBHQ </span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-family:"B Koodak"; font-size:11.0pt"> قبل و بعد از افزودن تیموکینون</span></p>-<p><span dir="RTL">تعیین اثر تیموکینون بر میزان سمیت سلولی آنتی اکسیدان </span>TBHQ<span dir="RTL"> بر رده سلولی HUVIC </span></p>-<p dir="RTL" style="text-align:right"><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-family:"B Koodak"">تعیین اثر تیموکینون بر میزان آپوپتوز آنتی اکسیدان </span></span><span dir="LTR" style="font-size:11.0pt">TBHQ </span><span style="font-size:11.0pt"><span style="font-family:"B Koodak""> در رده سلولی </span></span><span dir="LTR" style="font-size:11.0pt">HUVEC</span></p> <p dir="RTL" style="text-align:right"> </p> <p dir="RTL" style="text-align:right"> </p>-<p><span dir="RTL" lang="FA" style="font-family:"B Koodak"; font-size:11.0pt">تعیین اثر تیموکینون بر میزان شکستگی </span><span style="font-family:"Times New Roman","serif"; font-size:11.0pt">DNA</span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-family:"B Koodak"; font-size:11.0pt"> آنتی اکسیدان </span><span style="font-family:"Times New Roman","serif"; font-size:11.0pt">TBHQ </span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-family:"B Koodak"; font-size:11.0pt"> در رده سلولی </span><span style="font-family:"Times New Roman","serif"; font-size:11.0pt">HUVEC</span></p>-<p><span dir="RTL" lang="FA" style="font-family:"B Koodak"; font-size:11.0pt">تعیین اثر تیموکینون بر میزان شکستگی کروماتین آنتی اکسیدان </span><span style="font-family:"Times New Roman","serif"; font-size:11.0pt">TBHQ </span><span dir="RTL" lang="FA" style="font-family:"B Koodak"; font-size:11.0pt"> در رده سلولی </span><span style="font-family:"Times New Roman","serif"; font-size:11.0pt">HUVEC</span></p> |
| چکیده انگلیسی طرح | |
| کلمات کلیدی | ایمنی مواد غذایی: بررسی اثر یک ماده غذایی، از لحاظ ژنوتوکسیتی، سمیت سلولی، توکسیتی مزمن و حاد، خاصیت آلرژنی، ایمنو توکسیتی، نوروتوکسیتی، التهاب زایی، توکسیتی ارگان های هدف، سرطانزایی و کینتیک توکسیتی می باشد. که در این مطالعه با توجه به نوع مواد مورد ارزیابی و امکانات در دسترس، ایمنی آنها از لحاظ ژنوتوکسیتیک و سمیت سلولی مورد ارزیابی قرار خواهد گرفت(24). آنتی اکسیدان های مواد غذایی : آنتی اکسیدان ماده افزودنی است که از فساد ناشی از اکسیداسیون خود به خود در مواد غذایی جلوگیری و یا به تاخیر می اندازد آنتی اکسیدان ها در تغییر میزان انرژی مواد غذایی تاثیر قابل توجهی ندارند و آنتی اکسیدانهای مورد استفاده در صنایع روغن ،مشتقات اسید اسکوربیک و BTA، TBHQ و BHA ,AP,AS, توکوفرول و...میباشد(25). تیموکینون: ماده موثره سیاه دانه می باشد که خاصیت آنتی اکسیدانی ، ضد التهابی و ضد سرطانی دارد(26). تری بوتیل هیدروکینون: در صنعت غذا به عنوان آنتی اکسیدان برای روغن های گیاهی غیر اشباع و بسیاری از چربی های حیوانی خوراکی استفاده می شود. تغییر رنگ حتی در حضور آهن ایجاد نمی کند، و عطر و طعم و یا بوی مواد که به آن اضافه شده است را تغییر نمی دهد(8). سمیت سلولی: در طی این ارزیابی به بررسی اثرات یک ترکیب شیمیایی مانند افزودنی های غذایی که ممکن است منجر به بروز عوارض سمی در جمعیت انسانی و یا حیوانی گردد، پرداخته می شود. اساس این بررسی، ارزیابی میزان زنده مانی سلول در محیط های کشت است که شاخص اثرات توکسیک بالقوه ترکیب مورد نظر در سلول های زنده است. متدهای مختلف برای ارزیابی میزان سمیت سلولی وجود دارد که در این مطالعه از روش MTT استفاده خواهد شد(27). سمیت ژنتیکی: در طی این ارزیابی به بررسی اثرات یک ترکیب شیمیایی مانند افزودنی های غذایی که ممکن است منجر به بروز عوارض ژنتیکی در جمعیت انسانی و یا حیوانی گردد، پرداخته می شود. اساس این بررسی، ارزیابی تغییرات در DNA سلول در محیط های کشت است. متدهای مختلف برای ارزیابی میزان سمیت ژنتیک سلول وجود دارد که در این مطالعه از روش آپاپتوزیس، میزان فراگمانتاسیونDNA، میزان فراگمانتاسیون کروماتین سلول استفاده خواهد شد (28). آپاپتوزیس : آپوپتوز یا مرگ برنامه ریزی شده ی سلولی اس(7) |
| ذینفعان نتایج طرح | در صورت اثبات کاهش سمیت سلولی و ژنتیکیTBHQ تیمار شده با تیموکینون، و افزایش ظرفیت آنتی اکسیدانی آن ، می توان به عنوان یک آنتی اکسیدان قوی وایمن به صنایع غذایی معرفی نمود. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| پروین دهقان | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| جعفر عزتی نژاد دولت آبادی | استاد راهنما دوم (آموزشی ) |
| زهرا کریمی | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر تیموکینون دارای اثر محافظتی در برابر صدمات سلولی و ژنتیکی ناشی از آنتی اکسیدان TBHQ کاربردی در صنعت غذا می باشدمتن خبر در حال حاضر TBHQ به عنوان یک آنتی اکسیدان قوی به طور گسترده ه ای در صنایع غذایی و بویژه صنعت روغن برای مهار اکسیداسیون و افزایش ماندگاری روغنها مورد استفاده قرار می گیرد. بواسطه قیمت مناسب و اثرات آنتی اکسیدانی قوی درحال حاضر جایگزینی برای این ترکیب در صنعت وجود ندارد.اما نتایج مطالعات اخیر نشان می دهد که این آنتی اکسیدان قادر است با اسیبهای سلولی و ژنتیکی، سلامتی مصرف کنندگان این محصولات غذایی را تهدید نماید. بنابراین استفاده از آنتی اکسیدان های طبیعی به نظر میرسد ضمن کاهش مصرف این آنتی اکسیدان، تا حدودی آسیب های ناشی از این آنتی اکسیدان سنتتیک را مهار نماید. مطالعه حاضر نشان داد که تیموکینون به عنوان ماده موثره اصلی سیاه دانه (در غلظت 5،10 و 15 میکرومولار) زنده مانی سلول های تیمار شده با TBHQ (در غلظت 60 میکرو مولار) افزایش داد داد که این اثر در غلظت 10 میکرو مولار در مقایسه با سایر غلظتها بیشتر بود. در همین غلظت، تیموکینون، توانست اثر محافظتی خود را بر روی DNA هم اعمال نماید. اما تیموکینون هیچ تاثیری بر افزایش ظرفیت آنتی اکسیدانی TBHQ نداشت. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر تیموکینون دارای اثر محافظتی در برابر صدمات سلولی و ژنتیکی ناشی از آنتی اکسیدان TBHQ کاربردی در صنعت غذا می باشدمتن خبر در حال حاضر TBHQ به عنوان یک آنتی اکسیدان قوی به طور گسترده ه ای در صنایع غذایی و بویژه صنعت روغن برای مهار اکسیداسیون و افزایش ماندگاری روغنها مورد استفاده قرار می گیرد. بواسطه قیمت مناسب و اثرات آنتی اکسیدانی قوی درحال حاضر جایگزینی برای این ترکیب در صنعت وجود ندارد.اما نتایج مطالعات اخیر نشان می دهد که این آنتی اکسیدان قادر است با اسیبهای سلولی و ژنتیکی، سلامتی مصرف کنندگان این محصولات غذایی را تهدید نماید. بنابراین استفاده از آنتی اکسیدان های طبیعی به نظر میرسد ضمن کاهش مصرف این آنتی اکسیدان، تا حدودی آسیب های ناشی از این آنتی اکسیدان سنتتیک را مهار نماید. مطالعه حاضر نشان داد که تیموکینون به عنوان ماده موثره اصلی سیاه دانه (در غلظت 5،10 و 15 میکرومولار) زنده مانی سلول های تیمار شده با TBHQ (در غلظت 60 میکرو مولار) افزایش داد داد که این اثر در غلظت 10 میکرو مولار در مقایسه با سایر غلظتها بیشتر بود. در همین غلظت، تیموکینون، توانست اثر محافظتی خود را بر روی DNA هم اعمال نماید. اما تیموکینون هیچ تاثیری بر افزایش ظرفیت آنتی اکسیدانی TBHQ نداشت. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر تیموکینون دارای اثر محافظتی در برابر صدمات سلولی و ژنتیکی ناشی از آنتی اکسیدان TBHQ کاربردی در صنعت غذا می باشدمتن خبر در حال حاضر TBHQ به عنوان یک آنتی اکسیدان قوی به طور گسترده ه ای در صنایع غذایی و بویژه صنعت روغن برای مهار اکسیداسیون و افزایش ماندگاری روغنها مورد استفاده قرار می گیرد. بواسطه قیمت مناسب و اثرات آنتی اکسیدانی قوی درحال حاضر جایگزینی برای این ترکیب در صنعت وجود ندارد.اما نتایج مطالعات اخیر نشان می دهد که این آنتی اکسیدان قادر است با اسیبهای سلولی و ژنتیکی، سلامتی مصرف کنندگان این محصولات غذایی را تهدید نماید. بنابراین استفاده از آنتی اکسیدان های طبیعی به نظر میرسد ضمن کاهش مصرف این آنتی اکسیدان، تا حدودی آسیب های ناشی از این آنتی اکسیدان سنتتیک را مهار نماید. مطالعه حاضر نشان داد که تیموکینون به عنوان ماده موثره اصلی سیاه دانه (در غلظت 5،10 و 15 میکرومولار) زنده مانی سلول های تیمار شده با TBHQ (در غلظت 60 میکرو مولار) افزایش داد داد که این اثر در غلظت 10 میکرو مولار در مقایسه با سایر غلظتها بیشتر بود. در همین غلظت، تیموکینون، توانست اثر محافظتی خود را بر روی DNA هم اعمال نماید. اما تیموکینون هیچ تاثیری بر افزایش ظرفیت آنتی اکسیدانی TBHQ نداشت. |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر تیموکینون دارای اثر محافظتی در برابر صدمات سلولی و ژنتیکی ناشی از آنتی اکسیدان TBHQ کاربردی در صنعت غذا می باشدمتن خبر در حال حاضر TBHQ به عنوان یک آنتی اکسیدان قوی به طور گسترده ه ای در صنایع غذایی و بویژه صنعت روغن برای مهار اکسیداسیون و افزایش ماندگاری روغنها مورد استفاده قرار می گیرد. بواسطه قیمت مناسب و اثرات آنتی اکسیدانی قوی درحال حاضر جایگزینی برای این ترکیب در صنعت وجود ندارد.اما نتایج مطالعات اخیر نشان می دهد که این آنتی اکسیدان قادر است با اسیبهای سلولی و ژنتیکی، سلامتی مصرف کنندگان این محصولات غذایی را تهدید نماید. بنابراین استفاده از آنتی اکسیدان های طبیعی به نظر میرسد ضمن کاهش مصرف این آنتی اکسیدان، تا حدودی آسیب های ناشی از این آنتی اکسیدان سنتتیک را مهار نماید. مطالعه حاضر نشان داد که تیموکینون به عنوان ماده موثره اصلی سیاه دانه (در غلظت 5،10 و 15 میکرومولار) زنده مانی سلول های تیمار شده با TBHQ (در غلظت 60 میکرو مولار) افزایش داد داد که این اثر در غلظت 10 میکرو مولار در مقایسه با سایر غلظتها بیشتر بود. در همین غلظت، تیموکینون، توانست اثر محافظتی خود را بر روی DNA هم اعمال نماید. اما تیموکینون هیچ تاثیری بر افزایش ظرفیت آنتی اکسیدانی TBHQ نداشت. |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
