بررسی اثرنانوپارتیکل های پلیمری(PEI) حاوی SiRNA ضد CD44 درمهاررشد و مهاجرت سلول های سرطان سینه
Evaluation of the effects of anti-CD44 siRNA-containing polymeric nanoparticles (PEI) on inhibition of growth and migration of breast cancer cells
مجریان: بهزاد برادران
خلاصه روش اجرا: استفاده از روشهای متداول به منظور در مان این بیماری با محدودیتهایی از قبیل بروز عوارض جانبی جدی، وجود مقاومت دارویی، غیر اختصاصی بودن دارو و عود سرطان در نواحی دورتر همراه است. سرکوب بیان ژن در سطح پس از رونویس یکی از استراتژیهای مهم در ژن درمانی است. RNA کوچک مداخلهگر (siRNA)، مولکول RNA دو رشتهای است که قادر است به mRNA هدف متصل شده و بیان آن را مهار نماید. از مزایای این روش میتوان به درجه بالایی از تخصص در خاموشی ژن، قدرت بالا و کارایی زیاد، قابلیت القا خاموشی در مراحل پیشرفته رشد، قابلیت انتقال خاموشی ژن به نسل بعد و هزینه کم آن نسبت به دیگر روشهای ژن تراپی اشاره کردCD44 . جز پروتئینهایی در سلول است که در آپوپتوز و مهاجرت نقش دارد و مهار کنندهی چرخهی سلولی است .بیان زیاد این پروتئین در سلولهای سرطانی با پیشرفت تومور و تهاجم و مهاجرت تومور همراه است و نتایج مطالعات نشان دهندهی افزایش بیان این پروتئین در سرطانهای پستان متاستاز دهنده به استخوان است. در این مطالعه هدف آن است که با استفاده از siRNA اختصاصی، CD44 را به صورت مجزا در رده سلولی بنیادی سرطان سینه مورد هدف قرار داده و اثرات آن را در آپوپتوز سلولی، مهاجرت و مهار رشد سلولی بررسی کنیم. برای رسیدن به این اهداف، ابتدا سلولها در محیط مناسب کشت داده میشوند. برای تعیین میزان کاهش بیان ژن CD44 توسط siRNA، پس از استخراج RNA از روش SYBR Green quantitative PCR استفاده میگردد. روش MTT برای بررسی اثر سایتوتوکسیک سرکوب CD44 توسط مولکول siRNA انجام می گردد. وضعیت آپوپتوز سلولی توسط روش فلوسایتومتری و مهاجرت به روش wound healing assay بررسی می گردد. برای بررسی مهارStemness سلول های سرطانی از colony forming assay استفاده خواهیم کرد.
اطلاعات کلی طرح 
| مرحله جاری طرح | خاتمه قرارداد و اجرا در دانشکده/مرکز |
| کد طرح | 58843 |
| عنوان فارسی طرح | بررسی اثرنانوپارتیکل های پلیمری(PEI) حاوی SiRNA ضد CD44 درمهاررشد و مهاجرت سلول های سرطان سینه |
| عنوان لاتین طرح | Evaluation of the effects of anti-CD44 siRNA-containing polymeric nanoparticles (PEI) on inhibition of growth and migration of breast cancer cells |
| نوع طرح | طرح - پایان نامه |
| اولویت طرح | سلولهای بنیادی، مهندسی بافت و پزشکی بازساختی |
| نوع مطالعه | مطالعات علوم پایه (Experimental) |
| تحقیق در نظام سلامت | بلی |
| آیا طرح پایاننامه دانشجویی است؟ | بله |
| مقطع پایان نامه | کارشناسی ارشد |
| مدت اجرا - ماه | 12 |
| نوآوری و ضرورت انجام تحقیق | امروزه مطالعات گسترده¬ای به منظور درمان و کنترل روند سرطان سینه انجام می¬گیرد ولی همچنان مکانیسم -های مولکولی دقیق این بیماری شناخته نشده¬اند¬، مطالعات انجام گرفته شواهد محکمی دال بر ارتباط بین استفاده از siRNA و کنترل سرطان سینه می¬باشد. بیان4CD4 درسلول های سرطانی افزایش میابد و درکمک به رشدومتاستازسلول های بنیادی سرطان سینه نقش مهمی دارد و می¬تواند بعنوان یک هدف درمانی مطرح شود، بنابراین انتقال siRNA ضدCD44 توسط نانوذرات به داخل سلول های بنیادی سرطان سینه که CD44+ میباشند میتواند بیش از 75% بیان CD44 رامهارمیکند. در اینجا، ما تاثیرمهار 44CD فعال درسلول های بنیادی سرطان سینه را بااستفاده ازنانوذرات، درمهارمهاجرت ورشد سلول های سرطان سینه نشان خواهیم داد. |
| اهداف اختصاصی | بررسی میزان بیان , CD44 mmp9 ، VEGF، CXCR4 و miR-142پس انتقال نانوذره PEI حاوی siRNA ضدCD44 به سلول­های سرطانی سینه به روش Quantitative real-time PCR ( Q RT-PCR) -بررسی اثر سایتوکسیک سرکوب بیان ژن CD44 توسط siRNA اختصاصی طراحی شده در رده سلول سرطان سینه به روش MTT assay -بررسی تاثیرنانوذرات حاوی siRNA اختصاصی CD44 بر القاء آپوپتوز در رده سلول سرطان سینه به روش Annexin V staining -بررسی تاثیر siRNA اختصاصی CD44 بر مهار مهاجرت در رده سلول سرطان سینه به روش wound healing assay. -بررسی تاثیرsiRNA اختصاصی CD44 برخصوصیات stemness سلول های سرطان سینه ، بعد از انتقال نانوذره حاوی siRNA ضد CD44 |
| چکیده انگلیسی طرح | استفاده از روشهای متداول به منظور در مان این بیماری با محدودیتهایی از قبیل بروز عوارض جانبی جدی، وجود مقاومت دارویی، غیر اختصاصی بودن دارو و عود سرطان در نواحی دورتر همراه است. سرکوب بیان ژن در سطح پس از رونویس یکی از استراتژیهای مهم در ژن درمانی است. RNA کوچک مداخلهگر (siRNA)، مولکول RNA دو رشتهای است که قادر است به mRNA هدف متصل شده و بیان آن را مهار نماید. از مزایای این روش میتوان به درجه بالایی از تخصص در خاموشی ژن، قدرت بالا و کارایی زیاد، قابلیت القا خاموشی در مراحل پیشرفته رشد، قابلیت انتقال خاموشی ژن به نسل بعد و هزینه کم آن نسبت به دیگر روشهای ژن تراپی اشاره کردCD44 . جز پروتئینهایی در سلول است که در آپوپتوز و مهاجرت نقش دارد و مهار کنندهی چرخهی سلولی است .بیان زیاد این پروتئین در سلولهای سرطانی با پیشرفت تومور و تهاجم و مهاجرت تومور همراه است و نتایج مطالعات نشان دهندهی افزایش بیان این پروتئین در سرطانهای پستان متاستاز دهنده به استخوان است. در این مطالعه هدف آن است که با استفاده از siRNA اختصاصی، CD44 را به صورت مجزا در رده سلولی بنیادی سرطان سینه مورد هدف قرار داده و اثرات آن را در آپوپتوز سلولی، مهاجرت و مهار رشد سلولی بررسی کنیم. برای رسیدن به این اهداف، ابتدا سلولها در محیط مناسب کشت داده میشوند. برای تعیین میزان کاهش بیان ژن CD44 توسط siRNA، پس از استخراج RNA از روش SYBR Green quantitative PCR استفاده میگردد. روش MTT برای بررسی اثر سایتوتوکسیک سرکوب CD44 توسط مولکول siRNA انجام می گردد. وضعیت آپوپتوز سلولی توسط روش فلوسایتومتری و مهاجرت به روش wound healing assay بررسی می گردد. برای بررسی مهارStemness سلول های سرطانی از colony forming assay استفاده خواهیم کرد. |
| کلمات کلیدی | Stemness : یک ویژگی ضروری برای سلول های بنیادی که آن هارا ازسلول های عادی متمایزمیکند. سلول های بنیادی با این ویژگی قادربه تولیدسلول های سرطانی جدید و درعین حال self renewing خودخواهندبود. سرطان سینه :نوعی از سرطان که بعلت رشد بدون کنترل سلول¬های بدخیم در سینه ایجاد می¬شود. siRNA:¬ siRNA ها RNA های کوچکی به طول حدود 25-20 نوکلئوتید هستند که با اتصال به قسمت 3ˊ-UTR انتهای mRNA باعث مهار ترجمه و تجزیه آن می¬شوند. CD44 : مارکری درسطح سلول های بنیادی سرطان است که به رشد و مهاجرت سلول های سرطانی کمک میکند. نانوذرات پلیمری : ذرات کوچکی درحد نانو هستندکه هدف اصلی آنها ارسال محموله به محل هدف برای کاهش تخریب داروها و جلوگیری از آثار جانبی و همچنین افزایش دسترسی به دارو و تجمع آن در محل ضایعه است. با استفاده از نانو ذرات حامل دارو طیف وسیعی از داروها به بافتهای مورد نظر ارسال میشود. مشهورترین پلی کاتیون مورد استفاده برای انتقال ژن به درون سلول، پلی اتیلن ایمین (PEI) نام دارد. MMP-9 :Matrix metalloproteinase ΙΧ درمهاجرت و رگ زایی سلول¬های سرطانی نقش دارد. VEGF : فاکتوری است که سلول های سرطانی درصورت جهش ژن آن میتوانند ازهم جداشوند و شروع متاستاز و تهاجم رخ میدهد. همچنین این فاکتور برای رگ زایی مورد نیازاست. CXCR4 : فاکتورهایی هستند که برای اینکه سلول های سرطانی که در عروق درحال متاستازهستند بتوانند به بافت های خاصی مهاجرت کنند باید ژن تولید کننده ی این فاکتورها جهش پیداکند . |
| ذینفعان نتایج طرح | دراین مطالعه ما به بررسی اثرمهارCD44 درسلول های بنیادی سرطان سینه درمهار رشد ومهاجرت این سلول ها میپردازیم و درصورت مشاهده ی نتیجه ی خوبی میتوان این مطالعه را دربالین اجراکرد و دردرمان سرطان سینه برای بیماران استفاهده کرد. |
اطلاعات مجری و همکاران
| نام و نامخانوادگی | سمت در طرح |
|---|---|
| بهزاد برادران | استاد راهنمای اول (آموزشی ) |
| زهره بابالو | مشاور |
| جعفر مجیدی ذوالبین | مشاور |
| امیر علی مختارزاده | مشاور |
| داریوش شانه بندی | همکار اصلی |
| لیلی عاقبتی | همکار اصلی |
| بهزاد منصوری | همکار اصلی |
| فاطمه وحیدیان | دانشجوی مالک پایان نامه |
اطلاعات تفضیلی
| حوزه خبر | خبر |
|---|---|
| رسانه ها و مردم | عنوان خبر کاهش بیان CD44 به همراه دارو DOX منجر به افزایش میزان آپوپتوز, کاهش میزان مهاجرت, رشد و در سلولهای سرطان پستان گردید.متن خبر سرطان پستان شایعترین سرطان در زنان است. CD44 یک گلیکوپروتئین سطحی سلولی است که نقش مهمی در اتصالات سلول- ماتریکس, سلول-سلول و همچنین تعامل مهاجرت و تهاجم سلول های سرطانی ایفا می کند. بیان CD44 در سلول های سرطانی مانند سرطان سینه افزایش می یابد و نقش مهمی در کمک به مهاجرت و رشد و رگ زایی سلول های سرطانی پستان ایفا می کند و می تواند به عنوان یک هدف درمانی عمل کند.
نتایج حاصل از مطالعه انجام شده، نشان می دهد که siRNAاختصاصی CD44 به صورت درمان ترکیبی با دارو DOX به طور موثر بقای سلولهای سرطانی MDA-MB468 سینه را کاهش داده و سبب القا آپوپتوز و مهار رشد و مهاجرت و کلونیزاسیون در این رده سلولی می شود بنابراین می تواند به عنوان مکمل قوی در درمان سرطان سینه در نظر گرفته شود. |
| متخصصان و پژوهشگران | عنوان خبر کاهش بیان CD44 به همراه دارو DOX منجر به افزایش میزان آپوپتوز, کاهش میزان مهاجرت, رشد و در سلولهای سرطان پستان گردید.متن خبر سرطان پستان شایعترین سرطان در زنان است. CD44 یک گلیکوپروتئین سطحی سلولی است که نقش مهمی در اتصالات سلول- ماتریکس, سلول-سلول و همچنین تعامل مهاجرت و تهاجم سلول های سرطانی ایفا می کند. بیان CD44 در سلول های سرطانی مانند سرطان سینه افزایش می یابد و نقش مهمی در کمک به مهاجرت و رشد و رگ زایی سلول های سرطانی پستان ایفا می کند و می تواند به عنوان یک هدف درمانی عمل کند.
نتایج حاصل از مطالعه انجام شده، نشان می دهد که siRNAاختصاصی CD44 به صورت درمان ترکیبی با دارو DOX به طور موثر بقای سلولهای سرطانی MDA-MB468 سینه را کاهش داده و سبب القا آپوپتوز و مهار رشد و مهاجرت و کلونیزاسیون در این رده سلولی می شود بنابراین می تواند به عنوان مکمل قوی در درمان سرطان سینه در نظر گرفته شود. |
| سیاستگذاران درمانی | عنوان خبر متن خبر |
| سیاستگذاران پژوهشی | عنوان خبر متن خبر |
| لینک (URL) مقاله انگلیسی مرتبط منتشر شده 1 |
