اثرات محافظتی دی و تری پپتیدهای حاوی پرولین، گلایسین و لوسین بر هیستوپاتولوژی و آنزیمهای سلولی کبد، کلیه و بیضه در موش های دریافت کننده همزمان استرپتوزوتوسین با دزهای کم چندگانه (MLDS)

مجریان: مهران مسگری عباسی

خلاصه روش اجرا: بر اساس بررسی منابع انجام شده و خصوصیات ویژه اسیدهای آمینه جهت ایجاد خصوصیت زیست¬فعالی، -پپتیدهای سنتز شده به وسیله سه اسیدآمینه غیرقطبی (Aliphatic) شامل پرولین (Pro)، گلایسین (Gly) و لوسین (Leu) به صورت توالی¬های زیر به روش فاز جامد که توضیح داده شده است سنتز خواهند شد. Gly-Pro (Pep2) Gly-Leu (Pep3) Leu-Pro (Pep4) Leu-Pro-Pro (Pep5) Gly-Gly-Leu (Pep6) Leu-Leu-pro (Pep1) تعداد 8 گروه تایی موش آزمایشگاهی (سوری) نر بصورت تصادفی انتخاب خواهد شد. به 7 گروه (گروههای دیابتی) تزریق STZ به صورت داخل صفاقی صورت خواهد گرفت. تزریق پپتیدهای سنتز شده فوق، طبق پروتکل تزریق به 6 گروه از رتهای دیابتی انجام خواهد شد. دزهای مصرفی در پروپوزال ارائه شده است جهت استحضار مجددا الصاق میگردد. جدول 1: پروتکل تعیین¬شده برای مقدار مصرف (دز) پپتیدها و القاء دیابت در طی روزهالی آزمایش روز آزمایش 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 تزریق STZ (mg/kg) 50 50 50 50 50 - - - - - - - تزریق هر پپتید (mg/kg) 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 20 پپتیدهای (دی و تری¬پپتید) سنتز شده به وسیله سه اسیدآمینه غیرقطبی (Aliphatic) شامل: پرولین (Pro)، گلایسین (Gly) و لوسین (Leu) به صورت توالی¬های مختلف به روش فاز جامد تولید و تیمارهای آزمایشی شامل: گروه کنترل (شاهد) تزریق حامل خالص (آب مقطر استریل) گروه در معرض دیابت بدون پپتید و دریافت¬کننده دی¬متیل¬سولفوکساید (DMSO) به عنوان حلال پپتیدها گروه های در معرض دیابت دریافت کننده پپتیدهای محلول در دی¬متیل¬سولفوکساید (DMSO) هر پپتید بر روی 10 سر موش نر، به مدت 12 روز و مطابق پروتکل تعیین¬شده تحت آزمایش قرار گرفته و نتایج موثرترین پپتیدها گزارش خواهند شد. القای دیابت با تزریق به سمت راست حفره صفاقی (IP) در دزهای کم چندگانه (MLDS) به صورت یک پروتکل مشخص در طی پنج روز پشت سرهم برای القای یک دیابت خودایمن وابسته به انسولین که باعث القای آپوپتوزیس تحلیل-برنده سلول¬های بتا و ایجاد مقاومت سلولی به انسولین می¬شود، به انجام خواهد رسید. گروه شاهد تزریق سرم فیزیولوژی و گروه شاهد دیابتی بدون دریافت پپتید خواهند بود. جهت بررسی القاء و روند تغییر دیابت در کل دوره آزمایش به صورت یک در میان (روزهای زوج) گلوکز خون اندازه گیری خواهد شد. در انتهای دوره آزمایش دوازده روزه از حداقل شش سر موش نر از هر گروه نمونه های بافتی (کبد، کلیه و بیضه) برداشته خواهد شد. از نمونه ها بررسی پاتولوژی به روش هماتوکسیلن ائوزین، بررسی آپوپتوز به روش تانل، بررسی رنگامیزی mRNA به عمل خواهد آمد. از بافتهای مذکور پس از لیز سلولی و تهیه مایع بافتی آزمایشات SOD، GPx، MDA، کاتالاز، AST، ALT، ALP، TAC به عمل خواهد آمد. نتایج بررسی و تاثیر پپتیدها مورد آنالیز قرار خواهد گرفت.