ارزیابی سطح سرمی YKL-40 و همبستگی آن با شدت بیماری (28 DAS) در بیماران مبتلا به آرتریت روماتوئید

مجریان: محمد رضا جعفری نخجوانی , امیر قربانی حق جو

خلاصه روش اجرا: جمعیت هدف شامل کلیه بیماران مبتلا به آرتریت روماتوئید مراجعه کننده به بخش و درمانگاه روماتولوژی بیمارستان امام رضا(ع) و کلینیک شیخ الرییس تبریز می باشند که بر اساس معیار های ACR تشخیص گذاشته شده است . در این معیار همانگونه که از جدول مربوطه مشخص است بر اساس درگیری مفصل امتیاز 0 تا 5 و همچنین بر اساس ازمایشات سرولوژی از 0 تا 3 که با در د ر نظر گرفتن RF, anti CCP, ESR, CRP ,.. و در سپس راکتانت های فاز حاد و در نهایت مدت علایم با معیار 6 هفته خواهد بود ( جدول زیر ) ( 11) نمونه مورد مطالعه بیمارانی هستند که حایز معیارهای ورود و خروج توضیح داده شده در ذیل باشند. مطالعه حاضر مقطعی بوده و حجم نمونه با استفاده از نرم افزار Power and sample size program ( version no 3.1.2) با در نظر گرفتن مقادیر α=0.05 و power برابر 80% که معادل 0.8 در نظر گرفته می شود حجم نمونه با توجه به دو مقاله اصلی مورد توجه در مطالعه : Rheumatol Int. 2015 Sep;35(9):1541-7. doi: 10.1007/s00296-015-3244-y. Epub 2015 Mar 18. Serum levels of C-peptide are associated with coronary artery calcification in patients with rheumatoid arthritis. Burgmaier M1, Hoppe S, Krüger T, Mahnken AH, Ketteler M, Reith S, Mühlenbruch G, Marx N, Brandenburg V. Ann Rheum Dis. 2000 Oct;59(10):828-31. Serum levels of YKL-40 and C reactive protein in patients with hip osteoarthritis and healthy subjects: a cross sectional study. با در نظر گرفتن مقدارSD و Min مورد مطالعه و تخمین تعداد بیماران مبتلا شده و مراجعه کننده و α= 0.05, β=20% , Power = 0.8 n=1/2 با استفاده ازبرنامه ps-power-and-sample-size-calculation.software برا اساس مطالعات مشابه و بیماران مراجعه کننده در طول یک سال برآورد گردیده است مجموعا 90 نفر محاسبه می گردد که نسبت ½ معادل 60 بیمار از هرد و جنس و 30 گروه کنترول است که با توجه به کراتریا های اشاره شده انتخاب خواهند شد سعی خواهد شد. جهت حذف اثرات کهولت سنی و مطابقت مطالعه حاضر با مطالعات مشابه انجام شده محدوده سنی افراد مورد مطالعه با توجه پارامتر اصلی اندازه گیری و مقالات مشابه جهت حذف تاثیرات کهولت سنی بین 30 تا 70 سال در نظر گرفته خواهد شد. بیماران وارد شده در مطالعه حاضر افرادی خواهند بود که تحت درمان کلاسیک سه دارویی شامل داروهای زیر قرار دارند : 1. متوترکسات -25 mg/week 7.5 2. داروی پردنیزولون در شروع درمان 15 mg روزانه 3. هیدروکسی کلروکین mg 1000 روزانه افراد مورد مطالعه نباید مصرف دارو و ویتامین و ترکیبات آنتی اکسیدانت در حین مطالعه و یا حداقل 2 ماه قبل از مطالعه را داشته باشند و همچنین نباید از نظر بالینی و آزمایشگاهی مبتلا به دیابت ، هیپوتیروئیدی ،سندرم نفروتیک ، بیماری های کبدی ،کوشینگ ، چاقی (BMI> 30kg/m2 ( باشند. مصرف داروهای ضد حاملگی، مصرف غذاهای نا متعارف و سیگاری بودن نیز جزو شرایط خروج از مطالعه می‌باشد . میزان فعالیت بیماری بر اساس معیارهای DAS28 سنجیده میشود و بیماران به چهار گروه تقسیم بندی میشوند ، >5.1) ) فعالیت بیماری بالا و (>3.2 to <5.1) فعالیت بیماری متوسط و 2.6 to <3.2)) فعالیت بیماری پایین و (<2.6) بیماری خاموش. تمامی افراد مورد مطالعه پس از گرفتن رضایت نامه کتبی وارد مطالعه خواهند شد. نمونه های خون پس از حدود 12 ساعت ناشتایی گرفته شده و پس از انجام سانتریفیوژ در دور پایین سرم ها جدا خواهند شد .نمونه های سرمی تهیه شده تا زمان انجام آزمایشات در فریزر C0 -70 نگهداری می شوند . نمونه های سرمی در ویال های اپیندروف بصورت الیکویت های جداگانه نگهداری و در زمان شروع آزمایشات که پس از اتمام نمونه گیری می باشد مورد استفاده جهت انجام آزمایشات پیش بینی شده قرار خواهد گرفت. آزمایشات لازم عبارتند از : CBC-UA-Urea-Cr-ANA-Anti ds DNA-Anti ccp که به روش های فتومتریک – اتوآنالیزور – سل کانتر وELISA مورد سنجش قرار خواهند گرفت. در کنار این بررسی، آزمایشات دیگری نیز برای ارزیابی وضعیت کلی بیمار از لحاظ انواع بیماری های متابولیک انجام می گیرد از جمله : FBS, HbA1C, Lipid profile, ESR, CRP, ALT, AST ,LDH,CPK, پس از حایز شرایط بودن برای ورود به مطالعه از نمونه خون وریدی گرفته شده سطح سرمی پروتئین YKL-40 به روش ELISA مورد آنالیز قرار خواهند گرفت گروه کنترول شامل افراد سالمی هستند که از نظر سن و جنس با گروه بیماران هماهنگ شده و در صورت نیاز پس از تایید پزشک فوق تخصص مجری طرح چک شده و نیز در صورت نیاز پس از انجام ازمایشات روتین برای مطالعه حاضر با توجه به شریط ورود و خروج مطالعه پس از تکمیل فرم رضایت نامه که بپیوست می باشد و پس از تایید کمیته اخلاق مورد استفاده قرار خواهد گرفت . وارد طرح خواهند شد برای آنالیز آماری داده ها از نرم افزار آماری SPSS استفاده میشود. برای داده های حاصل از اندازه گیری تاثیر عوامل مورد مطالعه ابتدا میانگین و انحراف معیار ( خطای معیار ) محاسبه خواهد شد X+SD. هموژنیسیتی نتایج با تست kolmogorov simirnov test مورد بررسی قرار گرفت . همچنین skewnes , kurtosis مورد بررسی قرار خواهد گرفت و با توجه به نتایج بدست آمده نتایج بصورت Mean و یا Median گزارش خواهد شد. تیپ تست ها از نظر پارامتریک و یا نان پارامتریک مشخص خواهد شد جهت بررسی همبستگی از تست های pearson و یا Sperrman بر حسب نتایج بدست امده استفاده خواهد شد.