ساخت ستون کروماتوگرافی تری آزینه برای جداسازی ایمنوگلوبولینها


چاپ صفحه
پژوهان
صفحه نخست سامانه
اطلاعات تفضيلي
اطلاعات تفضيلي
مخترعين
مخترعين
دانلود
دانلود
علوم پزشکي تبريز
علوم پزشکي تبريز

اطلاعات کلي اختراع
hide/show

عنوان اختراع ساخت ستون کروماتوگرافی تری آزینه برای جداسازی ایمنوگلوبولینها
عنوان اختصاري
شماره ثبت اختراع 107739
تاريخ ثبت اختراع 1401/06/12
اختراع حقيقي است يا حقوقي
مدت حمايت از اختراع
نام محل ارائه
تاريخ ارائه
اعتبار کلي
نوع اختراع
نام شرکت/سازمان متبوع

اطلاعات تفضيلي
hide/show

آيتم اطلاعات تفضيلي متن
ادعاهای اختراعادعانامه آنچه ادعا می شود: ادعاها 1- ستون افینیتی کروماتوگرافی تری آذین با عنوان (CAES-6B-Cl@R1= MAF, R2= MAF) با هدف خالص‌سازی ایمنوگلوبولین¬هایG (IgG) از پلاسمای خون انسان بواسطه استفاده از سیانوریک کلراید، واکنشهای جانشینی نوکلئوفیلی توسط متا-آمینو فنول و تنوع دهی بافری ساخته شده است. 2- فعال سازی سطح افینیتی ستون سفاروز مورد ادعایی شماره 1، با ترکیبات اپی کلروهیدرین و 1و4-دی آمینوبوتان و سیانوریک کلراید صورت پذیرفته است. 3- لیگاند های مورد استفاده برای اصلاح سطح رزین سفاروز فعال شده مورد ادعایی شماره 2، طی مراحل زیر اتصال (binding) یافت: لیگاند متا-آمینو فنول با استفاده از واکنش جانشینی هسته دوستی SN2 بر روی میکرو بید CAES-6B-Cl متصل شد. در نهایت جهت تهیه میکرو بید نهایی (CAES-6B-Cl@R1= MAF, R2= MAF)، لیگاند متا-آمینو فنول با استفاده از واکنش جانشینی هسته دوستی SN2 بر روی میکرو بید CAES-6B-Cl@R1= MAF متصل شد. همچنین برای اتصال لیگاندها به میکروبید از نمکهای سدیم کلراید و گلایسین نمکهای استفاده گردید. 4- میزان اتصال ایمنوگلوبولین ها (binding yield) به ستون افینیتی کروماتوگرافی مورد ادعایی شماره 3، 09/22 میلی گرم ایمنوگلوبولین در میلی لیتر رزین بوده و میزان بازیافت (recovery) از رزین فوق 63/73 درصد و درجه خلوص آنتی بادی تخلیص شده حدود 95 درصد شد. رهاسازی (الوشن) آنتی بادی ها از ستون مورد ادعایی با استفاده از محلول های بافری گلاسین با pH=3 که می تواند حاوی نمک های کیوتروپیک (مانند پتاسیم تیوسیانات، اوره )، اسیدهای آمینه (مانند آرژینین)، حلال‌های آلی ( مانند دی اکسان، اتیلن گلایکول) و دترجنت ها انجام پذیرفت. 5- عوامل رهاساز ذکر شده در ادعای شماره 4، به تنهایی و یا در ترکیب با یکدیگر و یا سایر افزودنی‌ها مانند قندها، اسمولیت‌ها جهت رهاسازی آنتی بادی ها از سطح رزین افینیتی استفاده شدند.
خلاصه اختراعخلاصه توصیف اختراع به منظور تخلیص ایمونوگلوبولین G پلاسما به صورت اختصاصی ، استفاده از ستونهای کروماتوگرافی تمایلی حاوی میکروبیدهای اصلاح سطح شده مورد نیاز می باشد. پروتئین A و G رایج ترین و پرکاربردترین نوع روش جداسازی تمایلی ایمونوگلوبولینها هستند. از معایب این ستونها هزینه بالا، نشت لیگاند، پایداری پایین و از دست دادن فعالیت آنتی بادی در شرایط آزادسازی محیط اسیدی همراه است. ترکیبات شیمیایی به عنوان لیگاندهای شبه تمایلی میتواند پاسخگوی نیازهای مختلف مطرح شده برای جداسازی ایمونوگلوبولینها باشند. با دیدگاه غلبه بر موانع مذکور در فرآیند (تکنولوژی) خالص‌سازی ایمنوگلوبولین G (Ig G) ، در این اختراع فرآیند خالص‌سازی این ایمونوگلوبولین با استفاده از ستونهای کروماتوگرافی تمایلی حاوی میکروبیدهای اصلاح سطح شده با تری -آزین ساخت و آماده سازی شد. بعد از تهیه میکرو بیدهای پلیمری سفاروز صنعتی، سطح این میکرو بیدها توسط اپی کلروهیدرین پوشش داده شد و با 1و4-دی آمینوبوتان برای آمیناسیون سطح آماده سازی گردید. در نهایت لیگاندهای آلی توسط واکنش¬های جانشینی نوکلئوفیلی به سطح میکروبیدهای پلیمری (رزین سفاروز) متصل شدند. عملکرد میکرو بیدهای اصلاح شده با تری -آزین برای جداسازی ایمونوگلوبولین¬های G از پلاسمای خرگوش مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت از میان ستونهای کروماتوگرافی حاوی میکروبیدهای مذکور، ستون حاوی میکروبید با عنوان CAES-6B-Cl@RI=MAF, R2=MAF بعنوان میکروبید برتر همراه با شرایط عملیاتی بهینه، برای خالص‌سازی IgG تعیین و معرفی شد. تحت شرایط بهینه شده در این اختراع، درصد خلوص IgG، از پلاسمای خرگوش بالغ بر 95% شد.

مخترعين
hide/show

مخترعين درصد مشارکت
حامد فرضی خواجه75.0
محمد حسین صومی10.0
مصطفی اکبرزاده خیاوی5.0
اعظم صفری5.0
ساینا ترابی10.0

لينک دانلود
hide/show

نام فايل تاريخ درج فايل اندازه فايل دانلود
1.pdf1404/09/02192771دانلود
Development. Chromatography A .pdf1404/09/023831660دانلود
Grant.docx1404/10/1615035دانلود